De studie selecteerde een L-isoleucine auxotrofe Corynebacterium glutamicum stam FA-1 om de transaminase te onderzoeken die de synthese vanL-leucine en L-valine. De studie schakelde eerst het ilvE-gen uit en ontdekte dat nadat het ilvE-gen was uitgeschakeld, de L-valine-synthese-activiteit verloren ging, maar dat er nog steeds een zwak L-leucine-synthesevermogen was. Het laat zien dat er andere aminotransferasen zijn die de synthese van L-leucine katalyseren. Vervolgens werd het aspB-gen verder uitgeschakeld en ging het vermogen om L-leucine te synthetiseren volledig verloren. Op basis van het uitschakelen van ilvE, herstelde overexpressie van het aspB-gen de synthese van L-leucine tot op zekere hoogte (tabel 1). Deze resultaten geven aan dat het door aspB gecodeerde eiwit L-leucinesynthese-activiteit heeft.
Verder screende de studie enkele endogene en exogene aminotransferasegenen en bracht deze aminotransferasegenen tot expressie in ilvE- en aspB-co-knockout-stammen om te onderzoeken of deze aminotransferasen vertakte aminozuursyntheseactiviteit hebben. Onder hen vertoont TyrB specifieke L-leucinesyntheseactiviteit, terwijl YbgE en CallvE dubbele syntheseactiviteiten van L-leucine en L-valine vertonen. Deze resultaten geven aan dat het optimaliseren van transaminase om de substraatspecificiteit te veranderen een groot potentieel heeft om de opbrengst aan vertakte aminozuren te verhogen.
